XÂY DỰNG QUY TRÌNH REAL-TIME PCR ĐA MỒI XÁC ĐỊNH 3 CHỦNG VI KHUẨN LÂY TRUYỀN QUA ĐƯỜNG TÌNH DỤC THƯỜNG GẶP: CHLAMYDIA TRACHOMATIS, NEISSERIA GONORRHOEAE, TREPONEMA PALLIDU

Hoàng Hải Yến1,, Nguyễn Thị Thu Hường1, Phạm Thế Vương1, Nguyễn Thị Vân Anh1, Lê Thị Nga1, Trần Tuấn Anh2, Nguyễn Mạnh Trí1
1 Bệnh viện Phụ Sản Hà Nội
2 Viện Huyết học - Truyền máu Trung ương

Nội dung chính của bài viết

Tóm tắt

Mục tiêu: Xây dựng quy trình real-time PCR đa mồi phát hiện 3 chủng vi khuẩn lây nhiễm qua đường sinh dục thường gặp gồm: Chlamydia trachomatis, Neisseria gonorrhoeae và Treponema pallidum từ dịch phết cổ tử cung. Đối tượng và phương pháp nghiên cứu: 3 mẫu chứng chuẩn của 3 chủng vi khuẩn Chlamydia trachomatis, Neisseria gonorrhoeae, Treponema pallidum và 39 mẫu bệnh phẩm dịch phết cổ tử cung của những phụ nữ viêm âm đạo đến khám tại Bệnh viện Phụ sản Hà Nội từ 8/2023 đến 12/2023. Kết quả:  Quy trình real-time PCR đa mồi cho kết quả tốt trong khoảng nhiệt độ gắn mồi 560C đến 620C với chu kì ngưỡng từ 16,82 đến 20,12; thời gian gắn mồi từ 20 đến 60 giây có chu kỳ ngưỡng từ 17,02 đến 19,48. Giới hạn phát hiện (LOD) của quy trình với cả 3 chủng vi khuẩn là 102 copies/phản ứng, với tỉ lệ phát hiện 100%. Trong khi đó, ở nồng độ 1 copy/phản ứng, khả năng phát hiện của Neisseria gonorrhoeae là 95% và Chlamydia trachomatis là 100%. Kết quả đối chiếu song song cho thấy sự tương đồng hoàn toàn trên 39 bệnh nhân giữa hai phương pháp, với 11 mẫu dương tính Neisseria gonorrhoeae, 18 mẫu dương tính Chlamydia trachomatis và 10 mẫu âm tính với cả 3 tác nhân. Kết luận: Xây dựng thành công quy trình real-time PCR đa mồi có đủ điều kiện để xét nghiệm phát hiện đồng thời 3 chủng vi khuẩn: Chlamydia trachomatis, Neisseria gonorrhoeae và Treponema pallidum từ dịch phết cổ tử cung.

Chi tiết bài viết

Tài liệu tham khảo

1. Sexually transmitted infections (STIs). Accessed February 23, 2024. https://www.who.int/news-room/fact-sheets/detail/sexually-transmitted-infections-(stis)
2. Bray F, Ferlay J, Soerjomataram I, Siegel RL, Torre LA, Jemal A. Global cancer statistics 2018: GLOBOCAN estimates of incidence and mortality worldwide for 36 cancers in 185 countries. CA Cancer J Clin. 2018;68(6):394-424. doi:10.3322/caac.21492
3. Kim Y, Kim J, Lee KA. Analytical Performance of Multiplex Real-Time PCR for Six Sexually Transmitted Pathogens. Clin Lab. 2015;61(11):1749-1754. doi:10.7754/clin.lab.2015.150413
4. Rumyantseva T, Golparian D, Nilsson CS, et al. Evaluation of the new AmpliSens multiplex real-time PCR assay for simultaneous detection of Neisseria gonorrhoeae, Chlamydia trachomatis, Mycoplasma genitalium, and Trichomonas vaginalis. APMIS Acta Pathol Microbiol Immunol Scand. 2015;123(10):879-886. doi:10.1111/apm.12430
5. Gaydos CA, Cartwright CP, Colaninno P, et al. Performance of the Abbott RealTime CT/NG for Detection of Chlamydia trachomatis and Neisseria gonorrhoeae. J Clin Microbiol. 2010; 48(9):3236-3243. doi:10.1128/jcm.01019-10
6. Performance of the cobas CT/NG Test Compared to the Aptima AC2 and Viper CTQ/GCQ Assays for Detection of Chlamydia trachomatis and Neisseria gonorrhoeae Journal of Clinical Microbiology. Accessed February 23, 2024.
7. Real-time qPCR Guide: Assay Design, Data Analysis, Troubleshooting IDT. Accessed February 23, 2024.
8. qPCR Probes PrimeTime IDT. Integrated DNA Technologies. Accessed February 23, 2024.