ĐÁNH GIÁ MỘT SỐ YẾU TỐ ẢNH HƯỞNG TỚI CHẤT LƯỢNG NHUỘM MẢNH CẮT MÔ BẰNG KỸ THUẬT NHUỘM PERIODIC ACID SCHIFF (PAS) TRONG GIẢI PHẪU BỆNH

Tóm tắt

Đặt vấn đề: Nhuộm Periodic Acid Schiff (PAS) là một kỹ thuật nhuộm màu phổ biến trong lĩnh vực giải phẫu bệnh nhằm các cấu trúc giàu polysaccharide (glycogen, mucopolysaccharide và glycoprotein…). Chất lượng của mảnh cắt mô nhuộm PAS chịu ảnh hưởng bởi nhiều yếu tố như chuẩn bị mẫu mô, độ dày của mảnh cắt, chất lượng và nồng độ hóa chất, thời gian và điều kiện nhuộm. Mục tiêu nghiên cứu: Đánh giá một số yêu tố ảnh hưởng (loại mô, nhiệt độ phản ứng, nồng độ hóa chất và thời gian nhuộm) đến chất lượng nhuộm màu và đề xuất quy trình kỹ thuật nhuộm Periodic Acid Schiff (PAS) phù hợp được rút ra từ thực tế nghiên cứu. Đối tượng và phương pháp nghiên cứu: Nghiên cứu mô tả cắt ngang. Đối tượng nghiên cứu là 05 loại mô khác nhau (gan, phổi, thực quản, dạ dày, đại tràng), mỗi loại được chọn 6 mô và cắt 9 lát cắt khác nhau để thực hiện nhuộm PAS đánh giá các yếu tố ảnh hưởng. Kết quả: Kết quả nhuộm PAS ở các điều kiện khác nhau để đánh giá sự ảnh hưởng tới chất lượng nhuộm màu. Với yếu tố loại mô, tất cả các loại mô trong nghiên cứu đều đạt chất lượng: đại tràng (4 mẫu tốt, 2 mẫu đạt), dạ dày (3 mẫu tốt, 3 mẫu đạt),mô gan (02 mẫu tốt, 04 mẫu đạt), phổi và thực quản (6 mẫu đạt). Khi thay đổi thời gian biệt hoá acid periodic và phủ thuốc thử schiff, chất lượng tiêu bản nhuộm PAS có sự khác biệt có ý nghĩa thống kê (p<0,05). Chất lượng tiêu bản nhuộm PAS chủ yếu đạt (70%) và tốt (30%) khi biệt hoá acid periodic trong 7 phút; khi biệt hoá trong 40 phút, có 20% chất lượng tiêu bản nhuộm PAS không đạt chất lượng. Chất lượng tiêu bản nhuộm PAS chủ yếu đạt (70%) và chất lượng tốt (30%) khi phủ thuốc thử schiff đến khi mảnh mô bắt màu hồng. Khi phủ thuốc thử schiff 40 phút, có 66,7% tiêu bản có chất lượng không đạt. Không có sự khác biệt về chất lượng tiêu bản khi sử dụng acid periodic ở nồng độ 0,5% và 1,0%. Kết luận: Yếu tố loại mô, nhiệt độ, thời gian biệt hoá acid periodic và thời gian phủ thuốc thử schiff ảnh hưởng đến kết quả nhuộm PAS. Chất lượng tiêu bản nhuộm PAS tốt nhất với các loại mô đại tràng, dạ dày, gan, thực quản,… Quy trình nhuộm PAS tối ưu nhất khi tiến hành trong điều kiện nhiệt độ 25⁰C, thời gian biệt hoá acid periodic 0,5% trong 7 phút, thời gian phủ thuốc thử schiff cho đến khi mảnh mô xuất hiện màu hồng và thời gian phủ không quá 30 phút.